시험안내
시험안내 동물대체시험법
시험소개
동물 시험 대체법은 인류의 건강을 위하여 수행되고 있는 독성시험방법들을 동물보호 운동과 더불어 실험동물의 희생을 최소화 하도록 하여 시험물질의 독성을 검증하는 방법이다.
실험동물을 사용하지 않거나(Replacement), 동물의 수를 줄이거나(Reduction), 고통을 완하하는(Refinement)방법으로 시험을 수행하는 것을 원칙으로 한다.
피부감작성시험(Skin Sensitization)
ELISA를 이용한 국소림프절시험(Local Lymph node assay (LLNA) : BrdU-ELISA, OECD TG 442B)
CBA/J 또는 CBA/N 마우스에 시험물질를 도포하여 림프절내의 림프구를 증식을 유도한 뒤, ELISA를 이용하여 림프구 증식능을 측정하는 방법으로, 도포물질의 농도 및 알레르기 유발능에 비례하여 감작능을 객관적이고 정량적으로 측정할 수 있다.
유세포분석을 이용한 국소림프절시험(Local Lymph node assay (LLNA) : BrdU-FCM, OECD TG 442B)
BALB/c 마우스에 시험물질를 도포하여 림프절내의 림프구를 증식을 유도한 뒤, 유세포분석을 이용하여 림프구 증식능을 측정하는 방법으로, 도포물질의 농도 및 알레르기 유발능에 비례하여 감작능을 객관적이고 정량적으로 측정할 수 있다.
In Chemico 펩타이드 반응을 이용한 피부감작성 시험법(Direct Peptide Reactivity Assay (DPRA), OECD TG 442C)
시험물질이 시스테인, 리신 등의 아미노산과 결합하여 항원성이 있는 Haptenized 단백질이 형성되는 과정을 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC)를 이용하여 시스테인, 리신 아미노산의 소실율을 측정함으로 피부감작성을 평가한다.
인간세포주 활성화를 이용한 피부감작시험법(Human Cell Line Activation Test (h-CLAT), OECD TG 442E)
시험물질에 의한 수지상세포의 활성화에 의한 특정 세포 표면 표지자(CD86, CD54)의 발현수준을 유세포분석으로 정량화하여 피부감작성을 평가한다.
안자극시험(In Vitro Eye Irritation)
인체각막유사 상피모델을 이용한 안자극시험법(Reconstructed human Cornea-like Epithelium (RhCE) test method, OECD TG 492)
인체유래인공각막세포로 구성된 3차원 인공각막모델을 이용하여 국소적으로 적용하여 세포생존률을 산출하여 시험물질의 독성여부를 평가한다.
닭의 안구를 이용한 안점막자극 시험법(Isolated chicken eye test method, OECD TG 438)
적출된 닭의 안구에서 시험물질에 의한 각막의 손상 정도를 측정하여 UN GHS에 따른 심한 안손상을 유발하는 화학물질(UN GHS Category 1) 및 안자극 또는 심한 안손상에 대한 분류 및 표시가 필요하지 않은 화학물질(UN GHS No Category)을 평가한다.
피부자극시험(In Vitro Skin Irritation)
인체피부모델을 이용한 피부자극시험(Reconstructed Human Epidermis Test Methods , OECD TG 439)
시험물질을 비형질전환인체유래세포 각질세로로 구성된 3차원 인제피부모델에 국소적으로 적용하여 세포생존률을 산출하여 시험물질의 독성여부를 확인하는 시험이다.
피부부식시험(In Vitro Skin Corrosion)
장벽막을 이용한 피부부식시험(In Vitro Membrane Barrier Test Method for Skin Corrosion, OECD TG 435)
UN GHS에 따른 화학물질의 구분(UN GHS Category)을 확인 후, 합성 고분자 생체장벽과 화학물질 검출 시스템(Chemical Detection System, CDS)으로 구성된 인공막(Artificial membrane) 표면에 시험물질을 적용하여 피부부식에 의한 장벽막 손상을 확인한다.
피부흡수시험(In Vitro Skin Absorption Test method)
생체 외 피부흡수시험(Skin Absorption test : In Vitro Method, OECD TG 428)
시험물질이 피부를 통과하여 용액저장소로 이동한 양을 측정하는 방법으로, 인체 피부 또는 다른 종의 피부를 사용할 수 있고 시험물질에 대하여 반복 측정이 가능하며 실험동물을 사용하지 않고 노출 조건에 대한 평가 가능하다.
광독성시험(Phototoxicity)
생체 외 3T3 NRU 광독성시험(In Vitro 3T3 NRU Phototoxicity Test, OECD TG 432)
빛에 노출 후 야기된 화학물질에 의해 유도되는 잠재적 광독성을 평가하는 방법이다. 본 시험법은 빛의 유무에 따라 화학물질에 노출된 세포(BALB/c 3T3)의 생존률변화를 측정함으로써 광세포독성을 평가한다.
